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GFC Säulen
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für den Einsatz mit wässriger mobiler Phase |
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für die Analyse von biologischen Proben mit hohem Molekulargewicht, z. Bsp. Proteinen und die Molekulargewichts Bestimmungen |
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Silika basierende oder
Polymer basierende GFC Säulen?
Generell lässt sich sagen, das Silika basierende GFC Säulen eine bessere Auflösung bieten als Polymer basierende, da die Varianz der
Porengrösse enger und das Porenvolumen
grösser ist. Für die Trennung von Makromolekülen sollten hingegen Polymer basierende Säulen eingesetzt werden, da Silika Gel wegen seiner Sprödigkeit nicht mit grossen Poren
versetzt werden kann.
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Chromatogramm:
Standard Proteintrennung im Vergleich:
Silika basierende Säule (KW-8003)
Polymer basierende Säule (GF-510-HQ)
wässrig/organische GPC Säule (SB-803 HQ)
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Silika basierende GFC Säulen
- eignen sich zur Trennung von Proteinen mit niederem Molekulargewicht von einigen Tausend bis ca. einer Million Dalton
- der pH Wert des Eluenten darf 7.5 nicht überschreiten, da sich Silika Gel in einem Eluenten über pH 7.5 auflöst
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Polymer basierende GFC Säulen
- eignen sich zur Trennung von Proteinen, Lipoproteinen oder DNA mit einem Molekulargewicht von mehr als einer Million Dalton.
- können mit Eluenten bis in hohe pH Bereiche eingesetzt werden; der pH Bereich dieser Säulen liegt zwischen pH 3 bis pH 10
- sind mit Polyhydroxymethacrylate Gel gepackt:
....dies erlaubt die Analyse von Proteinen mit einem Molekular Gewichtsbereich von < 10.000
....mit einer Silika basierenden Säule könnten solche Proteine nur mit geringer Auflösung getrennt werden
- können mit einer Alkalin Lösung gewaschen werden, was sich positiv auf die Lebensdauer der Säule auswirkt
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Multi Mode GFC Säulen & wässrig/organische GPC Säulen
- sind mit einem dicht vernetzten Polyvinyl Alkohol Gel gepackt
- dies verzögert die Elution von Substanzen wie z. Bsp. Humanserum
....Humanserum hat eine grosse Affinität mit der Molekular Struktur des Packungsmaterials und tritt in Wechslewirkung mit dieser
Multi Mode Säulen
- können in verschiedenen GFC Modi gefahren werden, normal, Reversed-Phase oder Ionen Austausch
- erlauben einzigartige Fraktionierungsbereiche
- können mit den organischen Lösungsmitteln Methanol und Acetonitril eingesetzt werden
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